ПЦР (тестирање ланчане реакције полимеразе) је основна технологија у молекуларној дијагностици. Стандардизација његових процеса амбалаже и тестирања директно утиче на тачност и биолошку сигурност резултата. Овај чланак пружа професионалну перспективу на контролним тачкама кључних квалитета током процеса испитивања ПЦР-а.
Пријем узорка и претходно обраде су први кораци у процесу. Лабораторије морају стриктно верификовати идентификацију узорка, транспортне услове и време складиштења како би се осигурало интегритет узорка. По пријему узорци морају бити нумерисани и регистровани у ормару за биолошку сигурност и подвргнути пре - поступцима обраде као што су вађење лизе и нуклеинске киселине на основу типа испитивања. Потребан је двојицу - систем за верификацију особе током ове фазе како би се спречило Цросс - контаминација.
Припрема система за реакцију ПЦР-а мора се извести у оквиру чисте клупе. Оператори морају да носе заштитну опрему нивоа 3 и користе нуклеасе - бесплатне потрошње. Припрема реагенса придржава се принципу "једносмерно радног тока", прелазећи се из подручја припреме реагенса на подручје обраде узорка, а затим на подручје појачања. Негативне контроле, позитивне контроле и интерне контроле морају бити укључене у сваку реакцијску серију за праћење експерименталне валидности.
Током фазе амплификације и тестирања, ПЦР инструмент мора бити пре - калибрирани и температурни бициклистички параметри верификовани. Реакциони поступак обично укључује три корака: денатурација (94 - 95 степени), жарења (50-65 степени) и продужетак (72 степени). Број циклуса се прилагођава на основу циља детекције. Флуоресцентни ПЦР у реалном времену такође захтева праћење прага сигнала флуоресценције одређених канала.
Анализа и извештавање о резултатима морају обављати квалификовани техничари. Сирове податке морају прегледати најмање два професионалца да потврде морфологију кривуље појачања, веродостојност ЦТ вредности и усклађеност материјала за контролу квалитета са стандардима. Коначни извештај треба да садржи информације о методологији испитивања, основа за тумачење резултата и изјаве о ограничењима испитивања.
Целокупни процес се строго придржава ИСО 15189 и одговарајућим ЦДЦ спецификацијама. Примјењују се троструко гарантни систем праћења заштите животне средине, одржавање опреме и обуке за особље и осигуравање поузданости и сљедивости ПЦР тестирања.